“單槍匹馬”伏癌菌，免疫親和柱新上市

更新時間：2022-11-02 點擊次數：1299

微信截圖_20221102103714.png

01、概述

伏馬菌素 (Fumonisin FB) 是一種黴菌毒素，是由串珠鐮刀菌（Fusarium moniliforme Sheld）產(chan) 生的水溶性代謝產(chan) 物，是一類由不同的多氫醇和丙三羧酸組成的結構類似的雙酯化合物。伏馬菌素主要汙染糧食及其製品，並對某些家畜產(chan) 生急性毒性及潛在的致癌性，有報道指出，伏馬菌素主要損害肝腎功能，能引起馬腦白質軟化症和豬肺水腫等，並與(yu) 我國和南非部分地區高發的食道癌有關(guan) ，現已引起世界範圍的廣泛注意。已成為(wei) 繼黃曲黴毒素之後的又一研究熱點。

月旭科技新推出伏馬毒素（B1/B2/B3）免疫親(qin) 和柱，適合於(yu) 和HPLC或LC-MS結合使用，定量檢測FB1、FB2和FB3。適用於(yu) 糧穀、飼料等樣本中的伏馬毒素淨化處理，提高了樣品的純度，純化後的提取液可用於(yu) 不同的分析方法測定。

微信截圖_20221102103726.png

02、原理

淨化的基礎是抗原抗體(ti) 反應，伏馬毒素單克隆抗體(ti) 連接在柱內(nei) 凝膠介質上，樣品中的伏馬毒素經過提取、過濾、稀釋，然後將樣品提取液緩慢通過伏馬毒素免疫親(qin) 和柱，在免疫親(qin) 和柱內(nei) ，伏馬毒素與(yu) 抗體(ti) 結合，洗滌液通過免疫親(qin) 和柱除去未被結合的雜質。最後采用甲醇-乙酸洗脫伏馬毒素，然後進行相關(guan) 分析。

03、淨化步驟

1）準確稱取20g（精確至0.01g）粉碎的樣品；

2）先加入50mL樣品提取液混合，搖床振蕩提取30min，於(yu) 4000r/min，離心5min，取出上清液於(yu) 試劑瓶中；

3）將底部沉澱部分再加入50mL樣品提取液混合，以搖床振蕩提取30min，於(yu) 4000r/min，離心5min，取出上清液，與(yu) 前麵的上清液合並混勻；

4）準確移取10mL上清液，加入40mL 1.5%吐溫20-PBS稀釋，用玻璃微纖維濾紙過濾，至濾液澄清，備用。

5）準確移取15mL混勻濾液（相當於(yu) 0.6g樣品）過親(qin) 和柱。

6）3mL柱管上方堵頭直接連接20mL針筒固定後使用（柱管內(nei) 偶見有小氣泡屬正常現象，不影響親(qin) 和柱的使用）；

7）準確移取上述混勻濾液，注入注射器中，調節針筒壓力使其以2秒/滴的速度緩慢通過免疫親(qin) 和柱；

8）先用10mL PBS衝(chong) 洗柱子，再用3mL水衝(chong) 洗柱子，棄去流出液，流速1秒/滴，直至2~3mL空氣通過柱體(ti) ，保證柱子內(nei) 沒有殘餘(yu) 液體(ti) ；

9）準確加入3.0mL洗脫液洗脫，流速自然重力，直至2~3mL空氣通過柱體(ti) ，保證柱子內(nei) 沒有殘餘(yu) 液體(ti) 。收集全部洗脫液，進行相關(guan) 測定。

（注意：整個(ge) 純化過程盡量不要讓柱子幹燥！）