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親和層析之蛋白A

更新時間:2021-08-25 點擊次數:1093


球菌的細胞壁,與(yu) IgG的Fc片段具有非常強的特異性,分子量約為(wei) 42×103,如圖所示。一般在蛋白 A親(qin) 和層析中,配基在中性pH條件下結合抗體(ti) ,在酸性pH條件下與(yu) 蛋白解離。



蛋白A與(yu) 抗體(ti) IgG的Fc片段結合模式


基於(yu) 蛋白 A 親(qin) 和層析的抗體(ti) 捕獲工藝較為(wei) 穩定,但也存在一些不足,主要包括:

(1)介質成本高。

(2)配基易脫落。

(3)洗脫條件苛刻。

(4)Protein A介質的再生比較困難。


針對以上問題,部分商業(ye) 化蛋白A親(qin) 和層析介質中使用的基本為(wei) 改造的蛋白A配基,改善了天然蛋白A的缺點,提高了耐堿能力和洗脫 pH。月旭科技推出的耐堿抗體(ti) 親(qin) 和介質-耐堿Protein A Solid/耐堿Protein A 4FF, 由大腸杆菌表達,經層析純化獲得,純化過程不適用抗體(ti) 柱親(qin) 和層析,避免了產(chan) 品中摻入無關(guan) IgG的可能,改配基pH耐受0.5M NaOH和0.5M HCl處理,不降解,抗體(ti) 結合能力不變。該介質適合從(cong) 大批培養(yang) 液捕獲單克隆抗體(ti) 或Fc融合蛋白,也適合與(yu) 從(cong) 腹水或者血漿中捕獲多克隆抗體(ti) 。


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